Mouse EPO/Erythropoietin ELISA Kit检测试剂盒

规格 96 Test
灵敏度 0.07 pg/ml (10 μl)
标准曲线范围 2.74~2000 pg/ml
标准曲线梯度 7点/3倍
孵育次数 2
可检测样本 可溶性物质的液相样品。例如:血清,血浆,细胞培养上清,组织研磨液等。
加样体积 10 μl
类型 完全即用型
操作时长 120min
pg/ml O.D. Average Corrected
0.00 0.0178 0.0135 0.0157
2.74 0.0304 0.0264 0.0284 0.0128
8.23 0.0474 0.0548 0.0511 0.0355
24.69 0.1433 0.1391 0.1412 0.1256
74.07 0.4046 0.3610 0.3828 0.3672
222.22 1.1100 1.0450 1.0775 1.0619
666.67 2.6610 2.6220 2.6415 2.6259
2000.00 4.1867 4.2902 4.2385 4.2228

精度

Intra-assay Precision Inter-assay Precision
Sample Number S1 S2 S3 S1 S2 S3
22 22 22 6 6 6
Average(pg/ml) 32.9 169.3 528.9 33.9 176.3 571.3
Standard Deviation 0.9 3.3 20.1 0.9 9.0 27.4
Coefficient of Variation(%) 2.9 1.9 3.8 2.7 5.1 4.8

板内精密度:3 个已知浓度的样本酶标板内重复测定 20 次,评估酶标板内的精密度。

板间精密度:3 个已知浓度的样本酶标板间重复检测 6 次,评估酶标板间的精密度。

加标回收

健康小鼠血清加入 3 个不同浓度水平的小鼠EPO/Erythropoietin,未加小鼠的EPO/Erythropoietin血清作为本底,计算回收率。回收率的范围从 74 % 至 123%,平均回收率为 102%。

样本值

Sample Matrix Sample Evaluated Range (pg/ml) Detectable (%) Mean of Detectable (pg/ml)
Serum 30 6.43-488.96 100 71.25

应用本试剂盒,检测 30 个健康小鼠的血清样本,小鼠的用药史不详。

n.d. = 测不到浓度值。样本的浓度值低于灵敏度被认为测不到浓度值。

背景: EPO/Erythropoietin

促红细胞生成素 (Epo) 是一种 34-39 kDa 的分泌糖蛋白,是 I 型细胞因子超家族的成员。小鼠 Epo 基因编码一个 192 个氨基酸 (aa) 残基前体,其中包含一个 26 个氨基酸信号肽和一个包含三个潜在 N 连接糖基化位点的 166 个氨基酸成熟蛋白。小鼠 Epo 缺乏人类 Epo 中的 O-连接糖基化位点。尽管碳水化合物链不是体外受体结合所必需的,但它们是体内 Epo 生物活性所必需的。根据细胞来源的不同,会产生不同的 Epo 亚型,其聚糖组成和唾液酸含量不同。成熟小鼠和大鼠 Epo 具有 94% 的 aa 串行同一性。它们还与成熟的人类、猪、恒河猴和猫科动物 Epo 具有 80%-82% 的氨基酸同一性。 Epo 主要由肾脏(间质肾小管周围成纤维细胞)和肝脏(肝细胞和 Ito 细胞)中的细胞产生,其产生量会因缺氧而上调。其他组织和细胞,包括神经组织(星形胶质细胞和神经元)、睾丸(支持细胞)、子宫、胎盘和红系祖细胞,也被证明可以产生 Epo。
Epo 因其在红细胞形成中的作用而闻名。虽然 Epo 不是谱系定型因子,但它会抑制细胞凋亡并诱导突发形成红系单位 (BFU-E) 分化为集落形成单位红系 (CFU-E),以及随后 CFU-E 增殖和成熟为早期正常母细胞。除了在红细胞生成中的作用外,Epo 还作用于各种非造血细胞,充当活力和增殖因子。 Epo可以刺激成肌细胞增殖,同时抑制其分化,从而导致祖细胞群的扩张。 Epo 是一种组织保护因子,可防止神经元、心血管和肾组织发生缺血性和中毒性损伤。 Epo 还被证明可以在各种生理和病理条件下促进血管生成。
Epo 通过由两个 Epo R 亚基组成的高亲和力预制同型二聚体 Epo 受体 (Epo R) 结合并发出信号。每个 Epo R 亚基都是 I 型跨膜糖蛋白,属于 I 型细胞因子受体超家族。其胞外结构域包含特征性的两个 III 型纤连蛋白结构域和质膜附近的 WSxWS 基序。 Epo 与 Epo R 同二聚体的结合导致构象变化以及非受体蛋白激酶 JAK2 的磷酸化和激活,从而激活下游信号级联。另一种 Epo 异聚受体复合物可转导细胞保护信号,除 Epo R 亚基外还含有 β 共同受体 (β CR) 亚基。 beta CR 也属于 I 型细胞因子受体超家族,是异聚 IL-3、IL-5 和 GM-CSF 受体复合物共有的亚基。 Epo 以较低的亲和力与由 Epo R 亚基和 β CR 同二聚体组成的异聚受体结合。

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