Human TNF-α ELISA Kit检测试剂盒

规格 96 Test
灵敏度 0.21 pg/ml (50 μl) ;0.26 pg/ml (10 μl)
标准曲线范围 1.37~1000 pg/ml
标准曲线梯度 7点/3倍
孵育次数 2
加样体积 50 μl/10 μl
类型 完全即用型
操作时长 120min
pg/ml O.D. Average Corrected
0.00 0.0390 0.0402 0.0396
1.37 0.0588 0.0628 0.0608 0.0212
4.12 0.0819 0.0885 0.0852 0.0456
12.35 0.1693 0.1712 0.1703 0.1307
37.04 0.3876 0.3956 0.3916 0.3520
111.11 0.9071 0.9969 0.9520 0.9124
333.33 2.4084 2.3694 2.3889 2.3493
1000.00 4.3651 4.1387 4.2519 4.2123

精度

Intra-assay Precision Inter-assay Precision
Sample Number S1 S2 S3 S1 S2 S3
22 22 22 6 6 6
Average(pg/ml) 13 74.8 215.6 15.3 73.9 323.3
Standard Deviation 0.5 3.1 7.3 0.6 2.8 12.9
Coefficient of Variation(%) 3.7 4.1 3.4 4 3.8 4

板内精密度:3 个已知浓度的样本酶标板内重复测定 20 次,评估酶标板内的精密度。

板间精密度:3 个已知浓度的样本酶标板间重复检测 6 次,评估酶标板间的精密度。

加标回收

健康人血清加入 3 个不同浓度水平的人TNF-α,未加人 TNF-α 的血清作为本底,计算回收率。

回收率的范围从 95 % 至 105 %,平均回收率为 99 %。

样本值

Sample Matrix Sample Evaluated Range (pg/ml) Detectable (%) Mean of Detectable (pg/ml)
Serum 30 0.63-3.85 100 2.08

应用本试剂盒,检测 30 个健康志愿者的血清样本,志愿者的用药史不详。

n.d. = 测不到浓度值。样本的浓度值低于灵敏度被认为测不到浓度值。

背景: TNF-α

肿瘤坏死因子α(TNF-α),又称恶病质和TNFSF1A,是TNF超家族的原型配体。它是一种多效性分子,在炎症、免疫系统发育、细胞凋亡和脂质代谢中起核心作用。TNF-α还参与许多病理状况,包括哮喘、克罗恩病、类风湿性关节炎、神经性疼痛、肥胖、2型糖尿病、感染性休克、自身免疫和癌症。

小鼠 TNF-α 合成为 26 kDa II 型跨膜蛋白,由 35 个氨基酸 (aa) 细胞质结构域、21个氨基酸跨膜段和 179个氨基酸细胞外结构域 (ECD) 组成。在ECD中,小鼠TNF-α与大鼠共享95%的氨基酸序列同一性,与犬、马、猫、人类、兔和猪TNF-α共享80%的氨基酸序列同一性。它由多种免疫细胞、上皮细胞、内皮细胞和肿瘤细胞产生。TNF-α在细胞内组装以形成在细胞表面表达的非共价连接的同源三聚体。细胞表面TNF-α既能诱导肿瘤细胞和病毒感染细胞的裂解,又能在可溶性TNF RI连接后产生自身的下游细胞信号传导。TACE/ADAM17脱落膜结合的TNF-α释放生物活性细胞因子,一种含有TNF-α细胞外结构域的55 kDa可溶性三聚体。

TNF-α结合无处不在的55-60 kDa TNF RI和造血细胞限制的78-80 kDa TNF RII,两者都也表达为同源三聚体。I型和II型受体都以相当的亲和力结合TNF-α,并且可以促进NFkB活化。然而,只有TNF RI含有触发细胞凋亡激活的细胞质死亡结构域。两种受体的可溶性形式都释放到人血清和尿液中,可以中和TNF的生物活性。

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