帮助与常见问题
1. 可以使用部分攸克生命 ELISA 板吗？
攸克生命ELISA 板具有可拆卸的板条。未使用的板条可从平板上取下，放回装有干燥剂包的铝箔袋中，在 2-8° C 下最多储存 1 个月。
2. 可以使用蒸馏水代替去离子水来稀释试剂盒中的浓缩组分吗？
去离子水和蒸馏水均可用来稀释试剂盒中需要稀释的浓缩组分。
3. 组织匀浆或其他未经验证的样本类型能否使用ELISA试剂盒进行检测？
ELISA试剂盒可对其进行检测，可咨询攸克生命技术支持，以便获得最理想的实验结果。
4. ELISA板能否在检测孵育过程中相互堆叠？
为确保所有ELISA板所处的环境条件一致，建议在孵育期间不要堆叠ELISA板。
5. ELISA试剂盒支持验证标准曲线之外的浓度吗？
不支持验证标准曲线之外的标准浓度，标准曲线范围已经过验证，可在多个试剂盒批次和操作员中实现可靠和准确的性能。最低标准浓度是攸克生命可以保证的最低可靠限值。
6. 对含有Covid-19或其他病毒的样本进行ELISA测试时是否建议对其灭活？
不建议对含病毒的样本进行灭活。热和化学预处理可能会导致大多数蛋白质的构象变化。如果没有分子伴侣的帮助，这些蛋白质不会恢复到正常的构象。
7. 攸克生命是否将异嗜性封闭试剂添加到 ELISA 和免疫测定试剂盒中提供的检测稀释剂和校准品稀释剂中？您是否建议使用HBT试剂处理样品？
攸克生命不会在稀释剂中添加HBT试剂，而是配制专门的稀释剂，旨在减少假阳性，以获得最准确的结果。我们的稀释剂旨在最大限度地减少如结合伴侣因子、可溶性受体、HAMA 和类风湿因子等干扰因素。使用攸克生命免疫测定，无需向样品中添加异嗜性封闭试剂。
8. ELISA试剂盒是否经过不同物种间的交叉反应性评估？
不同物种的重组蛋白在 ELISA 试剂盒中进行交叉反应和干扰评估。
9. 同一样本重复孔的CV值大，是什么原因？
样本的重复性主要受到移液和清洗技术的影响。
10. 重组蛋白作为相应ELISA试剂盒中的对照。为什么我看到质量值存在差异？
首先，重组蛋白需要进行大量的稀释才能将其置于标准曲线范围内。通常需要从μg/mL稀释到pg/mL，任何移液错误或移液器校准错误都可能导致回收过度或回收不足。其次，标准品是根据试剂盒最初开发时制定的主校准因子进行校准，这些初始标准品的蛋白质测定成为制定所有新标准品的主校准品，这保证了攸克生命免疫测定试剂盒不同生产批次之间具有一致性。一般来说，当使用攸克生命ELISA测定蛋白质浓度时，质控瓶上规定量的回收率为+/- 15%。批次质控品之间的免疫可识别质量数可能存在细微差异，因此在ELISA中测量时，质控瓶上提供的标准浓度可能因批次而异。如果您使用蛋白质进行对照，最好根据 ELISA 中的测量值计算浓度数值，而不是在设置对照时使用小瓶上的质量数。
11. 攸克生命ELISA 试剂盒中包含的 ELISA 微孔板的尺寸是多少？
攸克生命ELISA试剂盒中包含的板符合微孔板的标准占地面积尺寸，200 mm x 150 mm x 58 mm（长x宽x高）。
12. 什么是竞争ELISA？
在竞争性免疫测定方法（也称为“标记分析物技术”），内源性未标记抗原和外源性标记抗原之间存在有限数量的抗体结合位点的竞争。因此，信号递减表示被测分析物浓度较高。
13. 什么是夹心ELISA？
夹心 ELISA 使用对样品中目标分析物具有特异性的固定化捕获抗体。将分析物与固定化抗体结合后，使用针对分析物的标记二抗进行检测。分析物“夹在”两种抗体之间。夹心ELISA非常灵敏，与标准曲线相比，获得的值是定量的。
14. 最高标准浓度的预期OD值范围是多少？
许多因素都会影响高标准浓度的OD值。信号可能因操作人员技术而异，适用于标准曲线制备、洗涤方法、孵育变异性和酶标仪校准的实验人员的技术而异。预计最大OD检测信号在 1.0 和 3.5之间。
15. ELISA血清/血浆/细胞培养上清中细胞因子的半衰期是多少？
攸克生命不确定天然样品（如血清，血浆或细胞培养上清）中细胞因子的半衰期。我们的建议是立即测定样品或等分到一次性体积，并将这些样品冷冻储存。我们建议避免样品重复冻融，以避免蛋白质降解。
16. 波长校正的目的是什么？我需要使用 570 还是 630 nm？
波长校正的目的是校正ELISA板中的光学缺陷。攸克生命通常建议在ELISA测定时将校正波长设置为630 nm，波长在 540 - 690 nm 之间均可用作校正。直接在 450 nm 处进行的 ELISA 测定数值可能更高且更不准确。
17. 为什么添加终止液后孔中呈绿色？
当孔中的底物未与终止液完全混匀时，就会发生这种情况。加入终止液后，轻轻敲击酶标板或放置于摇床上，直到孔中的混合物变黄。为防止这种情况发生，我们建议将移液器吸头与孔板成45度角轻接触孔的侧面，然后快速分液到孔中。这个角度和速度有助于将终止液分散到整个孔中。
18. 为什么检测范围没有扩展到规定的灵敏度？
灵敏度是统计上不等于零的最低可测量值，它是根据背景值和测定的固有变异性计算的。通常通过取 20 个重复的零浓度的平均OD值加上两个标准差来计算，该值可从标准曲线回归拟合得到。
19. 为什么ELISA 试剂盒中需要进行样品稀释？
稀释主要有两个原因。第一个原因是在某些测定中大多数样品读数高于标准曲线，因此需要稀释分析物水平以让其落在测定范围内；第二个原因是限制复杂基质中某些因素引起的干扰。
20. 为什么在某些测定中必须使用聚丙烯管进行标准稀释？
某些蛋白质或其他分析物会与玻璃和聚苯乙烯结合，但不容易与聚丙烯管结合。
