Human MMP-9 ELISA Kit检测试剂盒

CAT: EH0020 英文说明书
规格 96 Test
灵敏度 2.7 pg/ml (50 μl);7.9 pg/ml (10 μl)
标准曲线范围 13.72~10000 pg/ml
标准曲线梯度 7点/3倍
孵育次数 2
加样体积 50 μl/10 μl
类型 完全即用型
操作时长 120min
pg/ml O.D. Average Corrected
0.00 0.0143 0.014 0.0142
13.72 0.0212 0.021 0.0211 0.0070
41.15 0.0331 0.0334 0.0333 0.0191
123.46 0.0712 0.0673 0.0693 0.0551
370.37 0.1812 0.1728 0.1770 0.1629
1111.11 0.4692 0.4776 0.4734 0.4593
3333.33 1.2325 1.1987 1.2156 1.2015
10000.00 2.7141 2.6355 2.6748 2.6607

精度

Intra-assay Precision Inter-assay Precision
Sample Number S1 S2 S3 S1 S2 S3
22 22 22 6 6 6
Average(pg/ml) 225.2 1135.8 3363.1 234.0 1080.9 3328.7
Standard Deviation 6.4 58.6 182.6 12.3 16.5 111.9
Coefficient of Variation(%) 2.8 5.2 5.4 5.3 1.5 3.4

板内精密度:3 个已知浓度的样本酶标板内重复测定 20 次,评估酶标板内的精密度。

板间精密度:3 个已知浓度的样本酶标板间重复检测 6 次,评估酶标板间的精密度。

加标回收

健康人血清加入 3 个不同浓度水平的人MMP-9,未加人 MMP-9 的血清作为本底,计算回收率。回收率的范围从 89 % 至 114 %,平均回收率为 101 %。

样本值

Sample Matrix Sample Evaluated Range (pg/ml) Detectable (%) Mean of Detectable (pg/ml)
Serum 30 203.3-765.1 100 428.1

应用本试剂盒,检测 30 个健康志愿者的血清样本,志愿者的用药史不详。n.d. = 测不到浓度值。样本的浓度值低于灵敏度被认为测不到浓度值。

背景: MMP-9

基质金属蛋白酶(MMP),也称为基质蛋白,构成锌和钙依赖性内肽酶家族,其功能是细胞外基质(ECM)的分解和不同亚细胞环境中各种分子的加工。它们在许多正常的生理过程中起着重要作用,例如胚胎发育,形态发生,繁殖和组织重塑。他们还参与炎症和自身免疫性疾病,如关节炎、癌症和心血管疾病。虽然新合成的MMP的数量主要在转录水平上调节,但现有MMP的蛋白水解活性通过酶原或酶原的活化以及内源性抑制剂α2-巨球蛋白和金属蛋白酶(TIMPs)的组织抑制剂对活性酶的抑制来控制。

MMP-9(也称为明胶酶 B、92 kDa IV 型胶原酶、92 kDa 明胶酶和 V 型胶原酶)作为糖基化原酶分泌。酶原的活化涉及蛋白水解去除N端亲区,产生82 kDa活性酶。活跃的人MMP-9分别与小鼠和大鼠MMP-9具有72%和74%的氨基酸序列同一性。除了锌结合位点外,催化结构域还包含三个连续的纤连蛋白II型同源性单元,负责结合明胶。富含脯氨酸的铰链区域将催化结构域连接到C末端血红素样结构域。用4-氨基乙酸苯汞(APMA)对酶原进行体外处理不仅产生活性酶,而且还产生C端截短形式,其活性与活性形式相当。MMP-9降解ECM的成分,对变性胶原蛋白(明胶)具有高比活性。它可以切割III,IV,V和XI型的天然胶原蛋白,以及弹性蛋白,Nidogen-1和玻连蛋白。MMP-9 还可以裂解多种趋化因子和生长因子(例如 IL-1 β、CXCL8/IL-8、CXCL7、CXCL4、CXCL1、潜伏 TGF-β、膜结合的 TNF-α、VEGF 和 FGF 碱性)、淀粉样蛋白 β 肽、P 物质和髓磷脂碱性蛋白。这种作用可以增加或减少可溶性因子的生物活性,也可以将它们从与ECM的结合中解放出来。MMP-9还可以通过各种跨膜蛋白触发信号传导,或通过诱导它们从细胞表面脱落来抑制信号传导(例如CD44,E-钙粘蛋白,整合素,ICAM-1和IL-2 R α)。
MMP-9由多种正常和转化细胞产生,包括中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、星形胶质细胞、成纤维细胞、破骨细胞、软骨细胞、角质形成细胞、内皮细胞和上皮细胞。它对脉管系统产生生理和病理血管生成和重塑作用。活化的中性粒细胞释放不含TIMP-1的proMMP-9,允许从ECM中释放促血管生成FGF-2。与TIMP-1复合物中的MMP-9不会诱导FGF-2释放。中性粒细胞衍生的MMP-9加剧炎症反应,部分原因是产生胶原蛋白衍生的肽,诱导额外的中性粒细胞MMP9的释放。MMP-9还参与骨形成和重塑,甲基苯丙胺诱导的行为致敏和奖励,神经元突触重塑的调节,植入过程中的滋养层侵袭以及Serpin α1-蛋白酶抑制剂的失活。MMP-9粘附蛋白的脱落对肿瘤细胞侵袭性有直接影响。
MMP-9的循环水平在许多炎症性疾病中升高,包括腔内血栓形成,动脉粥样硬化,克罗恩病,丙型肝炎病毒感染,结直肠癌和杜氏肌营养不良症。MMP-9 与 TIMP-1 的比率在多发性硬化血清和囊性纤维化痰中也升高,但在巨细胞病毒感染期间血清中降低。游离MMP-9和MMP-9与脂钙素-2 / NGAL的复合物水平分别在卵巢癌和子宫感染患者的尿液中升高。

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